Евгения родилась 7 декабря 1982 года в Киеве в семье актера и режиссера Григория Гладия и Елены Кривды, служившей в театре «Колесо». Детство Жени прошло за кулисами театра и на съемочных площадках. Родители развелись, когда дочери не было еще и десяти лет. Вскоре Григорий уехал в Канаду и получил иностранное гражданство. Этот отъезд никогда не воспринимался Евгенией остро. Глава семьи всегда был крайне увлеченным профессионалом и подолгу отсутствовал дома, пропадая то на гастролях, то на службе в московском театре Анатолия Васильева. После переезда в Канаду Гладий помимо актерской и режиссерской практики приступил к преподавательской деятельности. Со временем театральные постановки Григория приобрели экспериментальный (местами даже мистический) характер с применением гипнотических сеансов. Но, несмотря на привычную с детства атмосферу актерской среды, Евгения далеко не сразу выбрала свою будущую профессию. Как позднее в одном из интервью призналась сама актриса, в детстве она была крайне закомплексованным и тихим ребенком. Долгое время девочка считала себя то излишне высокой, то чересчур полной. Даже не любила разговаривать на людях. В итоге сразу после школы Евгения подала документы в Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко на факультет романо-германской филологии. После окончания вуза Евгения попробовала себя в качестве переводчика иностранных языков, а затем школьного преподавателя. Но к обеим этим профессиям Гладий была равнодушна. Так пришло осознанное стремление стать актрисой. Евгения подала документы на поступление в Киевский национальный университет театра, кино и телевидения имени И. К. Карпенко-Карого. После прохождения вступительных экзаменов будущая актриса стала студенткой на курсе Николая Рушковского. Кинематографический дебютом Гладий стала работа в итальяно-американском триллере Дэвида Греко «Эвиленко». Картина рассказывала о маньяке Андрее Чикатило. Несмотря на существование реального прототипа, проект не был документальным. Главную роль в картине исполнил Малкольм МакДауэл.
В общей сложности Евгения Гладий исполнила порядка двадцати ролей в кино. Примерно половина из них – это работы в телесериалах. Некоторые фильмы были созданы украинскими режиссерами, а большое количество поздних проектов снималось под руководством российских кинематографистов. Таким образом, Евгения была одинаково востребована как в родной Украине, так и в России. Начиная с 2007 года, Гладий присоединилась к труппе Киевского академического драматического театра на Подоле. Среди ее работ – роль Маркизы Доримены в спектакле «Полоумный Журден» и Анны Кирилловны в постановке другого произведения Михаила Булгакова – «Дневник молодого врача».
