В середине 50-х годов Рита Гладунко начала активно сниматься в кино. Первая известность пришла к актрисе с ролью разведчицы Марины Казанич в фильме «Часы остановились в полночь» Николая Фигуровского. В основу сюжета картины были положены подлинные события, происшедшие в оккупированном Минске. Кинолента имела большой успех среди зрителей, вошла в десятку лидеров проката. В 1960 году режиссёр Николай Фигуровский снова доверил молодой актрисе главную роль в своём фильме, на этот раз – в киноповести «Весенние грозы». Рита Гладунко исполнила роль Ольги, которая в 1945 году возвращается в родной город после плена и приступает к поискам своего мужа. В итоге оказывается, что супруг, считая жену погибшей, уже женился повторно…
Весьма активно снималась Гладунко и в 60-70-е годы, играя либо героинь историко-революционных кинолент, либо своих современниц. Среди наиболее заметных её работ можно выделить следующие: Елена Николаевна – в «Заговоре послов», Марина – в картине «Гулящая», Лиля – в фильме «Город – одна улица», Нина – в киноленте «Прощай», Вера Сергеевна – в детективной ленте «Выстрел на границе», Тамара Шевелькова – в мелодраме «Ещё не вечер», Зинаида Тарасевич – в картине «Я родом из детства», Клава – в фильме «Любовь Серафима Фролова», Анна Коноплева – в мелодраме «Седьмое небо». Запомнилась Рита Гладунко и по небольшой роли в комедии «Тридцать три» Георгия Данелии.
Дочь актрисы, Людмила Гладунко, пошла по стопам матери, она начала сниматься в кино с 13 лет, став известной артисткой.
Рита Гладунко скончалась 17 мая 1996 года.
