Родилась 11-го февраля 1969-го года в штате Калифорния в актерской семье. Вскоре после рождения дочери семья отправилась на один год в Грецию, куда их пригласил друг отца и крестный отец Дженнифер. А позднее они поселились в Нью-Йорке. Родители Энистон разошлись, когда ей исполнилось девять лет, девочка осталась с матерью, но часто навещала отца в Лос-Анджелесе, где тот играл в телесериале. Уже в школьные годы Дженнифер начала изучать актерское мастерство в драматическом кружке школы Рудольфа Штайнера. Также она увлекалась живописью и одна из ее акварелей даже выставлялась в музее Metropoliten.
В 1987-м году Энистон окончила школу актерского мастерства в Нью-Йорке. Вскоре она уже исполнила роли в нескольких вне-Бродвейских постановках. Но дальше театральная карьера не заладилась, и Дженнифер пришлось подрабатывать официанткой и велокурьером. Был период, когда она даже помышляла о смене профессии и отправилась на курсы психологии.
В итоге Энистон решает попытать счастья в Лос-Анджелесе. Там она встречает агента, согласившегося ее представлять, но тот ставит ей условие – в обязательном порядке похудеть. Потеря веса положительно сказалась на карьере Энистон: постепенно ей начинают доставаться небольшие роли в сериалах. Ну а дебют Энистон на большом экране состоялся в фильме «Леприкон».
Вскоре Дженнифер успешно проходит отбор на исполнение одной из главных ролей в новом проекте – телесериале «Друзья», который, будучи крайне популярным, оставался в эфире десять лет и послужил ступенью к развитию дальнейшей карьеры актрисы. За роль Рэйчел Энистон была удостоена премии «Золотой глобус». Из актерского состава сериала она первой начала активно сниматься в большом кино. Так в 1996-м году Энистон играет в фильме «Только она единственная», а позднее выходят «Портрет совершенства», «Объект моего увлечения», «Тонкая розовая линия». А роль в малобюджетном фильме «Хорошая девочка» неожиданно оборачивается заметным успехом с большим количеством лестных отзывов критиков. В тот же период выходят драма «Рок-звезда» и комедийная мелодрама «Брюс всемогущий», главные роли в которой исполнили Джим Керри и Морган Фриман. Хорошо принята зрителями была и комедия «А вот и Полли».
После окончания съемок в сериале «Друзья», карьера Дженнифер Энистон начинает развиваться еще стремительней, она получает приглашения на роли в различных картинах и порой начинает отходить от привычного комедийного образа. Так в 2005-м году она исполняет одну из главных ролей в триллере «Цена измены». Основав продюсерскую компанию, Энистон начинает сама продюсировать некоторые из фильмов со своим участием. В последующие годы выходит целый ряд успешных фильмов с ее участием, такие как романтическая комедия «Развод по-американски» (2006) , комедийная драма «Любовный менеджмент» (2008), комедия «Марли и я» (2008), мелодрама «Любовь случается» (2009), комедия «Притворись моей женой» (2011), «Жажда странствий» (2012), «Мы – Миллеры»(2013), «Новогодний корпоратив» (2016), «Пышка» (2018) и «Убийство на яхте» (2019). А самой ее последней заметной работой стала роль телеведущей Алекс Леви в сериале «Утреннее шоу» (2019).
С 2000-го по 2005-й год Энистон состояла замужем за Брэдом Питтом и их отношения любила освещать пресса. Так большинство СМИ причиной развода обозначили нежелание Дженнифер заводить детей, на разрыв отношений повлиял и начинавшийся роман Питта с его будущей женой Анджелиной Джоли. Со слов Дженнифер, преодолеть этот трудный период ей помогли занятия йогой. Позже на съемках фильма «Жажда странствий» актриса познакомилась с Джастином Теру, с которым у нее завязался роман. В 2015 году они поженились, но уже в 2018-ом объявили о разрыве отношений.