Родился 18 августа 1978 года в городе Беркли штата Калифорния, в семье фотографа и учительницы младших классов. Его дедушка был председателем Американского еврейского конгресса. С детства Энди – поклонник известного американского телешоу «Субботним вечером в прямом эфире» (с 1975) и проявлял к нему практически нездоровый интерес: мальчик следил за шоу, круглыми сутками думал о людях, которые там выступают, и мечтал тоже когда-нибудь оказаться вместе с ними на одной сцене. Все это мешало учебе, он был очень рассеянным. В 1996-ом Сэмберг поступил в школу при Калифорнийском университете в Санта-Круз. Впрочем, через два года он решил все-таки связать свою жизнь с драматическим искусством и поступил в Школу кино при Нью-Йоркском университете. Другим серьезным увлечением молодого человека была музыка. Вместе с приятелями Джормой Тэккоун и Акивой Шафером он создал комедийную труппу The Lonely Island («Одинокий остров»), которая с успехом выступала в Нью-Йорке. Трио также сочиняло музыку для того самого шоу «Субботним вечером в прямом эфире». В 2001 году 23-летний Сэмберг выступил в качестве режиссера и сценариста, сняв короткометражку «Белая сила» (2001), а затем еще две ленты: Awesometown (2005) и Regarding Ardy (2003).
В 27 лет Энди исполнил детскую мечту и поучаствовал в съемках телешоу «Субботним вечером в прямом эфире» в качестве комика. Они с с другом исполнили песню в стиле «хип-хоп». Выступление произвело фурор в Америке, веселая, зажигательная манера поведения обрела массу поклонников. В другой раз в этом же шоу Энди выступил в паре с Джастином Тимберлэйком. Дуэт с ним принес Сэмбергу награду «Эмми»: Creative Arts Emmy.
Следующая песня Энди, I'm on a Boat, которую его группа «Одинокий остров» исполнила вместе с хип-хоп певцом T-Pain'ом, получила номинацию на «Грэмми». Постепенно Сэмберг стал неотъемлемой частью шоу, ведущим комиком страны, а его песни собирали не только миллионную аудиторию у телевизоров, но и тысячи просмотров в интернете.
В 2009 году он стал ведущим ежегодной церемонии MTV Movie Awards.
Продюсеры активно использовали популярность певца и приглашали его на различные роли в фильмах, претендовавших на успех у массового зрителя. В 2007-ом году Энди снялся в главной роли каскадера-самоучки в комедии «Лихач». В 2008-ом году он в появился в комедийной мелодраме «Будь моим парнем на пять минут» в эпизодической роли, а через год – в фильме «Люблю тебя, чувак» (2009). В 2011 году Сэмберг порадовал публику комедиями «Сколько у тебя?» с Анной Фэрис и «Секс по дружбе» с Джастином Тимберлэйком и Милой Кунис.
В 2012 году Энди сыграл ведущие роли в комедиях «Папа-досвидос» с Адамом Сэндлером и «Дружинники» с Беном Стиллером. В 2012-ом, после семи лет работы, он покинул любимое телешоу «Субботним вечером в прямом эфире». Актер начал больше времени посвящать съемкам в кино: в 2013 году ожидаются фильмы «Одноклассники 2» и «Ручная работа» с его участием. Продолжил Сэмберг и музыкальную карьеру: его группа «Одинокий остров» выпустила второй альбом.
Также Энди озвучивает мультфильмы: например, его голос принадлежит главному персонажу ленты «Облачно, возможны осадки в виде фрикаделек» (2009).
