Родился 1 июля 1952 года в Оттаве (Канада). Его отец был государственным служащим, в конце своей карьеры он занимал пост заместителя министра транспорта в Оттаве. Дэн Эйкройд получил высшее образование в родном городе, в университете Карлтон на отделении психологии, политологии и криминологии.
Тем не менее, после окончания университета Дэн начал работать на радио, а затем стал выступать с канадским театром импровизаций «Second City Comedy». Он достаточно быстро стал раскрывать себя не только как актёр, но и в качестве талантливого сценариста и режиссёра телевизионных программ.
Первая серьёзная работа в кино пришлась на 1977 год, когда Дэн Эйкройд получил главную роль в картине «Любовь с первого взгляда». После данной ленты актёр снялся в нескольких фильмах, но они не принесли огромной популярности. А в 1980 году произошёл настоящий прорыв, так как именно тогда на экранах появилась культовая лента «Братья Блюз», в которой и поучаствовал Дэн Эйкройд. Роль в данной картине открыла перед актёром новые горизонты.
В 1981 году вышел фильм «Беспокойные соседи», где Дэн сыграл одну из главных ролей. В 1983 году вышла гениальная комедия «Поменяться местами», где партнёром Эйкройда по съёмочной площадке стал Эдди Мёрфи. На следующий год Дэн Эйкройд снялся в двух ещё более культовых картинах «Индиана Джонс и храм Судьбы» и «Охотники за привидениями». Пару лет актёр снимался в различных фильмах, а уже в 1987 году снова сыграл главную роль, на этот раз в пародийной криминальной комедии «Сети зла». В конце 80-х – начале 90-х Дэн Эйкройд появлялся в лентах «Охотники за привидениями - 2», «Одни неприятности», «Чаплин», «Моя дочь», «Яйцеголовые».
С конца 90-х годов и до нынешнего момента Дэн Эйкройд участвовал в десятках кинематографических, мультипликационных и телевизионных проектах. Так, например, актёр появился в великолепной картине «Эволюция» с Дэвидом Духовны и Джулианной Мур.
